分子伴隨診斷是臨床預測患者響應免疫藥物幾率的核心環節，其中，基于腫瘤組織細胞的程序性死亡配體-1（programmed cell death-Ligand 1，PD-L1）表達水平評估免疫治療獲益性是目前最常見與最成熟的手段。不幸的是，部分晚期患者不滿足手術或穿刺指征導致無法獲取腫瘤組織樣本，因此亟需開發依托于液體活檢技術的免疫用藥指導方案。

    允英醫療聯合上海市瑞金醫院開展臨床科研攻關，借助于允英自主研發的采血管產品、RNAplus?高效RNA提取技術、Alldetect? qPCR檢測平臺以及IHC檢測平臺，對比了PD-L1在胃腸癌患者血漿樣本與腫瘤組織樣本間的表達關聯性，并首次明確血漿PD-L1表達可能是胃癌患者響應帕博利珠單抗（Pembrolizumab，可瑞達）治療的重要預測指標。

    為了探索基于血液樣本檢測PD-L1的液體活檢方案是否可行，本研究首先在TCGA（The Cancer Genome Atlas）公共數據庫中調查了胃癌（stomach adenocarcinoma，STAD）、結腸癌（colon adenocarcinoma，COAD）以及直腸癌（rectum adenocarcinoma，READ）患者腫瘤組織中PD-L1表達水平與患者特征間的相關性。結果表明，PD-L1在胃腸道腫瘤組織中的表達水平不受患者的年齡、性別等因素影響。此外，盡管PD-L1表達水平與結腸癌患者腫瘤分期、直腸癌患者一線治療預后存在顯著相關性（p < 0.05），但總體上并未發現不同PD-L1表達水平的胃腸癌患者間存在統計學顯著的生存期差異，提示胃腸癌患者總生存時間與患者PD-L1表達間不具有相關性，初步明確了不同患者間基線差異不會干擾PD-L1表達定量結果。

    研究隊列由52名胃腸癌患者構成，入組人員均使用允英采血管采集10 mL血液樣本，同時還提供了配對腫瘤組織樣本作為對照?；颊哧犃邪凑詹煌±眍愋头譃槲赴?3人，44.2%）、結腸癌（19人，36.5%）與直腸癌（10人，19.2%），依托允英IHC檢測平臺完成了組織中PD-L1表達水平，并以1%作為cut-off閾值將不同病理患者細分為PD-L1 IHC陰性與陽性隊列。值得注意的是，無論胃癌，結腸癌還是直腸癌，PD-L1 IHC表達檢測或qPCR檢測結果均與組織樣本中腫瘤細胞含量無顯著相關性，繼續排除了由樣本中腫瘤細胞數量差異造成的潛在干擾因素。

    隨后，本研究對比了不同方法檢測PD-L1表達水平的一致性。結果提示，經組織IHC評估的陽性組胃腸癌患者中，采取qPCR定量法獲得的PD-L1表達水平也相對較高，盡管這一趨勢并未表現出統計學顯著性差異。有趣的是，在進一步對比了依托于qPCR平臺所分別獲取的血液與組織樣本中PD-L1表達定量結果后，我們發現，僅有胃癌患者隊列表現出弱線性相關（p < 0.05）性，腸癌隊列則無論結腸癌還是直腸癌不同樣本中檢測的一致性均較差，提示血液PD-L1可能是一個獨立的評價指標。

    為了驗證血液PD-L1表達水平的臨床意義與預測價值，本研究再次前瞻性招募了15例胃癌患者，所有患者治療前均按照上述實驗設計流程提供10 mL血液樣本并檢測了PD-L1表達狀況，然后接受了標準帕博利珠單抗（Pembrolizumab，可瑞達）治療。三個療程后，依據患者疾病進展狀況評估了患者對免疫治療藥物PD-1抑制劑的響應率。結果發現，相比于預后差組（疾病穩定或疾病進展），預后好組（疾病部分緩解）胃癌患者在接受治療前血中PD-L1表達水平明顯高于前者，差異具有統計學顯著性（p < 0.05）。此外，這15名患者的ROC曲線數據顯示，基于血液PD-L1表達水平預測的胃癌患者響應免疫治療幾率，其特異性與敏感性分別能夠達到75%和85.7%。